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人单核细胞THP-1培养指南 - 尊龙凯时品牌解析

发布时间:2025-02-13   信息来源:尊龙凯时官方编辑

人单核细胞白血病细胞THP-1概述

本文介绍人单核细胞白血病细胞THP-1的生长特性及培养方法。这些细胞具有圆形、悬浮的特征,适合在无血清冻存液中保存。我们的冻存条件为使用1640培养基加10% FBS,且加入0.05mM β-巯基乙醇与1%双抗。

人单核细胞THP-1培养指南 - 尊龙凯时品牌解析

细胞传代方法

建议首次传代比例为1:2。一般情况下,细胞在2到3天内须更换液体或传代。在传代时,请注意离心收集悬浮细胞,切勿直接倾倒细胞培养液。

细胞培养注意事项

在细胞收到后,应尽快培养至良好状态。为确保细胞健康,建议灌满完全培养液并妥善封好瓶口。使用75%酒精对细胞瓶进行消毒后,需在超净台内进行无菌操作。接着将细胞瓶放入37℃、5% CO2培养箱内静置3-4小时,以便稳定细胞状态。需要时,请在显微镜下观察细胞的生长情况,并分别拍摄不同倍数的细胞照片(建议40x、100x、200x各一张)。

细胞传代步骤

- 如果细胞汇合度低于80%,应收集瓶内的培养液至离心管中,保留5ml完全培养基,然后在37℃、5% CO2孵箱中继续培养。 - 当细胞汇合度超过80%时,可以进行传代。对于悬浮细胞,建议采用以下两种方法: 1. 方法一:以1000 RPM离心8-10分钟,弃去上清液,加入1-2ml培养液后混匀,按照1:2到1:5的比例分装到含有8ml培养基的新皿或瓶中。 2. 方法二:采用半数换液,将一半培养基弃去后,将剩余细胞悬起,按1:2到1:3的比例分装至新皿或瓶中。

冷冻与复苏方法

- 当细胞覆盖培养瓶的80%时,进行以下步骤冷冻: 1. 收集悬浮细胞至离心管并以1000 RPM离心5分钟。 2. 弃去上清,加入1ml雅吉生物无血清冻存液,混匀后装入冻存管。 3. 将冻存管放入−80℃冰箱保存,若后续转入液氮,需在−80℃冰箱存放24小时以上。 - 复苏步骤: 1. 从液氮中取出冻存管,快速放入37℃水浴解冻并消毒管外壁。 2. 将细胞置于含5ml完全培养基的离心管中以1000 RPM离心5分钟。 3. 重悬后接种至T25培养瓶,放于37℃、5% CO2培养箱中继续培养。

售后服务指南

针对细胞出现问题的处理: 1. 遇到运输问题、污染、存活率低等情况,需在收到后48小时内及时反馈。 2. 细胞如因客户原因引起污染或不良状况,将不予重发。 3. 所有问题需在规定时间内提供详细的实验结果及照片,以便核实。 4. 为保护您的权益,建议保存细胞前后三天的照片。

在细胞培养过程中,如果您对婴儿鼠细胞THP-1的处理有疑问,请随时咨询我们。我们鼓励您使用尊龙凯时品牌的相关产品,以确保最佳的培养性能和细胞活性。在细胞生物医学研究领域,我们致力于为您提供优质服务及支持。