树突状细胞（Dendritic Cells，DCs）在天然免疫识别病原体及后续适应性免疫反应的激活中起着至关重要的作用。尽管DCs广泛存在于多种组织中，其数量相对稀少，这限制了科学研究和临床治疗的进展。因此，研究人员积极探索体外培养和扩增DCs的方法。在小鼠模型中，最常用的技术是通过骨髓细胞诱导形成骨髓来源的DC（Bone Marrow-Derived Dendritic Cells, BMDCs），这通常需要在粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素-4（IL-4）等细胞因子的环境中进行细胞分化。BMDCs成为研究免疫反应、抗原呈递及细胞免疫调控的重要工具。

上海交通大学药学院沈琦研究团队在知名学术期刊《Advanced Functional Materials》上发表了题为“Self-adjuvanting bacteriahydrogelfor SHP1 checkpoint inhibition in tumor-draining lymph nodes to enhance cancer immunotherapy”的研究成果。作者设计的AAM水凝胶系统结合了多重机制，通过增强DCs的免疫活性，以提高肿瘤免疫治疗的效果。研究中采用了重组小鼠GM-CSF和IL-4进行BMDCs的诱导，结果表明，MHV能够通过甘露糖受体定位于BMDCs，进而通过温和的光热效应诱导肿瘤细胞进行免疫原性细胞死亡（ICD），释放肿瘤抗原并激活BMDCs。

同样，苏州大学FUNSOM的陈倩团队在《Advanced Materials》发表了相关研究，题目为“AMinimalist Pathogen-Like Sugar Nanovaccine for Enhanced Cancer Immunotherapy”。在这项研究中，作者也使用重组小鼠GM-CSF和IL-4诱导骨髓细胞分化为BMDCs，旨在体外验证疫苗的免疫激活效果及抗原特异性T细胞的增殖情况。

实验所需材料包括6-8周龄的C57BL/6小鼠、手术工具、磷酸盐缓冲液（PBS）、离心管、注射器、细胞过滤器，以及BMDCs培养基（RPMI1640、10%胎牛血清、抗生素及所需细胞因子）。

具体的实验步骤如下：

1. 取适龄的C57BL/6健康雌鼠，颈椎脱臼处死后，在75%乙醇中浸泡，并于超净工作台表面灭菌15分钟。取出股骨和胫骨，去除表面肌肉，抽取骨髓细胞。
2. 将收集的细胞悬液经过70μm无菌滤网过滤后，在4℃下离心分离。
3. 加入红细胞裂解液，终止裂红后再次离心。
4. 将细胞重悬于含有GM-CSF、IL-4及β-巯基乙醇的完全培养基中，按照规定接种在培养瓶中。
5. 培养期间，定期振荡并更换新鲜培养基，以增进细胞的分化质量。
6. 在第六天，用流式细胞术检测细胞的成熟度，确定CD11c+细胞及CD80+CD86+细胞的比例，以评估BMDCs的分化程度。

尊龙凯时的实验研究强调了优化细胞培养及免疫因子的使用，以确保树突状细胞的有效诱导和成熟。

在本文中，我们回答了一些常见的问题，例如如何判断树突状细胞的成熟、如何提高BMDCs的诱导效率，以及如何处理低细胞存活率等。这些问题的解决方案包括优化细胞密度、确保细胞因子的适宜浓度和保存条件等。

总之，通过科学的实验设计与方法，结合尊龙凯时的优势资源，BMDCs将在肿瘤免疫治疗及其他生物医疗研究中发挥更加重要的作用。