尊龙凯时的人卵巢癌细胞A2780培养说明书为研究人员提供了详细的细胞培养指导，确保实验的顺利进行。以下是有关细胞培养的核心内容。

一、细胞培养条件

细胞名称：人卵巢癌细胞A2780
生长特性：贴壁生长
冻存条件：无血清冻存液
培养体系：1640培养基 + 10% FBS + 1% L-谷氨酰胺 + 1% P/S
传代方法：建议第一次以1:2比例进行传代。
备注：用无菌离心管收集培养基，以留作对比培养。如对比效果不佳，建议直接购买尊龙凯时的完全培养基。

二、细胞处理流程

细胞收到后，请培养至良好状态，灌满完全培养液并封好瓶口，以确保运输细胞的最佳状态。在处理前用75%酒精消毒细胞瓶，并在超净台内严格按照无菌操作进行。将细胞瓶置于37℃、5% CO2的培养箱中，静置3-4小时，静待细胞状态稳定后再进行后续处理。在显微镜下观察细胞生长情况，并拍摄不同倍数的照片（建议40x, 100x, 200x各一张），前三天的图像是重要的售后依据，若未提供照片则默认状态良好。

三、细胞培养步骤

a、细胞传代

如细胞汇合度未超过80%，请收集培养液至离心管中，保留5ml完全培养基于37℃、5% CO2孵箱中培养；当细胞密度超过80%时，可进行传代。具体步骤如下：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶，约1-2ml至培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟。观察细胞状况，若大部分细胞脱落，迅速取出，轻敲瓶子后加5ml完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打细胞后吸出，转移至15ml离心管中，1000 RPM离心5分钟，弃上清，加入1-2ml完全培养基重悬。
4. 按1:2的比例分瓶传代（可分为两个T25瓶），补充5-8ml的培养基后，放入37℃、5% CO2细胞培养箱中培养。

b、细胞冻存

在细胞生长至培养瓶80%覆盖率时，弃去培养液并用PBS清洗细胞一次；接着添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml，观察细胞状态，当细胞变圆后，加入5ml完全培养基终止反应，轻轻吹打使细胞脱落，转移至15ml离心管，1000 RPM离心5分钟。弃去上清后，加入1ml 尊龙凯时的无血清冻存液（货号：C7001），混匀后加入冻存管中。将冻存管直接放入-80℃冰箱，若后续需转入液氮罐，请在此条件下存放24小时以上。

c、细胞复苏

从液氮中取出冻存管（需佩戴防护面具），迅速放入37℃水浴中解冻，直至管内无结晶，然后用75%的酒精擦拭外壁。将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000 RPM离心5分钟。弃去上清后，将细胞重悬于5ml完全培养基中，接种至T25培养瓶，放入37℃、5% CO2细胞培养箱中培养。次日更换为新鲜的完全培养基继续培养。

四、注意事项

某些细胞在运输过程中可能会因脱落而表现不佳，这是正常现象。请将培养瓶内的所有培养液收集至离心管中，1000 RPM离心5分钟以收集沉淀。随后加入胰酶1-2ml，轻轻吹打重悬，消化1-2分钟后加入5ml完全培养基终止反应，再次离心，弃上清，重悬；按1:2的比例进行分瓶传代，补充新的完全培养基后放入37℃、5% CO2细胞培养箱中培养。

五、售后条款

有关细胞问题的重发情况包括：运输过程中细胞丢失、瓶身破损、培养液漏液等，进行重发；收到后48小时内出现污染等问题，需提供实验结果经核实后重发等情况。同时，某些由客户原因导致的问题如污染、操作不当等将不予重发。所有问题处理将依据详细步骤核实，并与技术人员沟通。

如需更多信息，请访问尊龙凯时官方网站。