在生物医疗的广阔领域中，神经退行性疾病无疑是一个既神秘又令人揪心的课题。这类疾病如同潜伏在大脑深处的“隐形杀手”，悄然侵蚀患者的神经细胞，导致从记忆衰退到运动功能障碍，从认知能力下降到情绪失控的一系列痛苦症状。每个症状都如同一把利刃，切割着患者及其家人的生活。目前，嗓音——神经退行性疾病（NDDs）的主要表现形式包括阿尔茨海默病（AD）、帕金森病（PD）、肌萎缩侧索硬化症（ALS）及亨廷顿病（HD）。这些疾病的共同特征是错误折叠的蛋白质在神经细胞中异常聚集，造成神经元功能的丧失甚至死亡。

亨廷顿病因其单基因显性遗传的特性而显得尤为特殊，作为神经退行性疾病中的“典型代表”，以其独特的遗传性和毁灭性的病程，让无数家庭深陷绝望。患者因基因突变生成变异的亨廷顿蛋白（mHtt），其N端的多聚谷氨酰胺（polyQ）序列形成不可溶的聚集体。随着疾病的发展，他们会逐渐出现不自主运动、认知障碍及精神行为问题，甚至体重显著下降。通常在确诊后，患者的生存期仅为15至20年，而目前尚无根治手段，各种现有药物仅旨在缓解症状。因此，早期诊断和精准定量mHtt蛋白成为了延缓病情的关键突破口。

传统检测方法如免疫组化和滤膜捕获等存在灵敏度低、操作繁琐和无法动态监测蛋白形态变化等因素，极大限制了疾病机制的研究和新药的开发。

亨廷顿病的蛋白聚集机制

亨廷顿蛋白（mHtt）的可溶性单体与聚集态纤维在疾病进程中动态变换：可溶性mHtt在早期可能具有毒性，促进神经元损伤；而聚集态mHtt形成包涵体，但其毒性作用仍有争议。传统技术难以精准区分这两种形态，并无法在微量样本中同时进行定量分析，导致关键病理机制长期未解。

TR-FRET双重免疫分析方法

TR-FRET技术基于荧光共振能量转移（Förster Resonance Energy Transfer, FRET），利用标记抗体对来检测抗原。该方法通过稀土离子荧光团供体和受体之间的能量转移实现信号检测。当供体和受体标记的抗体同时结合抗原时，产生特定的TR-FRET信号。该技术具有高灵敏度、高特异性、快速且适用于小体积样本的优势，同时支持多重检测的潜力。

文章使用2B7和MW1抗体对可溶性mHtt进行检测，MW1能特异性识别扩展的polyQ序列。当mHtt聚集时，该表位被遮挡，导致TR-FRET信号的消失。聚集态mHtt的检测则使用4C9和MW8抗体，这些抗体能够在聚集物中找到多个结合位点，从而产生TR-FRET信号。单个抗体结合多个重复表位，通过双标记生成特异性信号，巧妙规避传统方法中表位遮蔽的挑战，如同为蛋白动态装上“实时监控探头”。

TR-FRET技术的优势

该技术能够在5微升样本中同步定量可溶性与聚集态mHtt，灵敏度极高，能精准识别低至300 kDa的可溶性片段与950 kDa的聚集态复合物。同时，动态追踪研究显示可溶性mHtt的减少与聚集态mHtt的增加呈负相关关系。

在亨廷顿小鼠模型中，研究发现小脑与海马区域的聚集速率低于纹状体，提示脑区特异性病理差异。此外，在睾丸等高增殖组织中，可溶性mHtt含量高却无聚集，挑战了“聚集即毒性”的传统观点，这将为开发靶向可溶性mHtt或抑制聚集的治疗策略提供关键工具。

尊龙凯时的高性能酶标仪助力研究

TR-FRET技术离不开高性能酶标仪的支持，尊龙凯时的SpectraMax iD5具备荧光、发光、光吸收等基本检测功能，并支持共振能量转移技术如FRET、TR-FRET及Western Blot等。该仪器的独特优势在于多通道检测，能够同步读取不同荧光信号，避免交叉干扰；超微量分析技术仅需微升级样本，降低了实验成本；并且具备自动化兼容性，无缝衔接高通量平台，以加速药物研发进程。对于科研人员而言，这项技术不仅是解密退行性疾病的“钥匙”，更是推动精准医疗落地的重要工具。未来，TR-FRET或将成为阿尔茨海默病、帕金森病等蛋白聚集疾病研究的标准工具。

照亮退行性疾病的“黑暗角落”

亨廷顿的研究突破彰显了技术创新对生命科学的深远影响。TR-FRET技术凭借其灵敏、高效及多维分析特性，为退行性疾病的机制研究与治疗开发开辟了新的路径。或许在不久的将来，我们不仅能“看见”蛋白的异常聚集，还能够通过精准干预，按下疾病进展的“暂停键”。