HepG2细胞系简介

HepG2细胞（HEPG2）是一种具有上皮样形态的细胞系，最初是从一名15岁阿根廷白人男性肝癌患者的肝细胞中分离而来。该细胞系能够分泌多种重要的血浆蛋白，例如清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原及铁传递蛋白等，表现出良好的转染能力。HepG2细胞的标志物包括胰岛素及胰岛素样生长因子II（IGFII），成为研究肝细胞功能及病毒模型的重要工具。

细胞生长特性

HepG2细胞的生长通常表现为贴壁性，初期在培养瓶壁上形成小岛状结构，随后可能会出现多层堆积或悬浮状态。因其强大的贴壁性，该细胞广泛应用于肝细胞功能的研究及病毒感染模型的搭建。

培养条件

HepG2细胞适宜在含87% MEM（不含非必需氨基酸）和10%进口胎牛血清的培养基中生长。除此之外，还需添加1% L-alanyl-L-glutamine、1%丙酮酸钠及1%双抗。培养环境要求95%的空气和5%的二氧化碳，在37℃条件下维护细胞活力。

传代培养方法

1. 观察细胞是否有脱落现象，将培养液移入无菌离心管中，进行离心处理以收集悬浮细胞。
2. 使用PBS洗涤贴壁细胞，加入胰酶进行消化，直至细胞大部分脱落。
3. 再次用完全培养基中和消化反应，轻轻吹打以确保细胞完全解离，最终将细胞悬液转移至新培养瓶中。推荐在T25培养瓶中添加5-7ml的完全培养基，并在2-3天后更换培养基。

细胞冻存与复苏

1. 在细胞密度达到80%以上、活细胞比例超过95%时，进行细胞的消化收集并准备冻存。
2. 用4°C的冻存液重悬细胞，通常建议为每瓶T25细胞准备一个1ml的冻存管存储。
3. 在解冻时，将冻管迅速置于37°C水浴中，进而进行离心和重悬，最后调整细胞密度并转移至培养瓶中。

常见问题解答

1. 如果培养过程中有细胞碎片，通常可通过更换培养基或者PBS洗涤来减轻这种现象。
2. HepG2细胞中出现的空泡现象是正常的，不影响细胞生长。
3. 若细胞生长缓慢，可以考虑适当增加血清浓度。
4. 细胞聚集或不贴壁的原因可能与培养基的pH值和血清质量有关，使用高质量低内毒素的培养基可改善这一问题。

总的来说，HepG2细胞作为一种重要的研究工具，在肝细胞生物学及药物开发等领域展现出广泛的应用前景。我们建议您使用尊龙凯时品牌的高质量培养基，促进HepG2细胞的生长与转染效率。